Maria Gładkowska urodziła się 16 września 1957 roku w Zielonej Górze. Jest absolwentką Państwowej Wyższej Szkoły Teatralnej w Warszawie.
Na ekranie zadebiutowała w 1976 roku w serialu "Polskie drogi". W swojej karierze zagrała w wielu filmach i serialach, m.in. w "Magnacie", "Mieście prywatnym", "Dögkeselyü" i "Yes, Yes".
Gładkowska jest również ceniona jako aktorka teatralna. Występowała na scenach Teatru Nowego im. Dejmka w Łodzi, Teatru Syrena w Warszawie i Teatru Skene Warszawa.
Za swoje osiągnięcia aktorskie Gładkowska otrzymała wiele nagród, m.in. Zbigniew Cybulski Award, Nagrodę im. Aleksandra Zelwerowicza i Nagrodę im. Ludwika Sempolińskiego.
Prywatnie Maria Gładkowska była czterokrotnie zamężna. Jej ostatnim mężem był operator filmowy Sławomir Idziak.
Maria Gładkowska jest jedną z najbardziej znanych i cenionych polskich aktorek. Jest ikoną polskiego kina i teatru.